從葉綠素檢測儀的測量原理說起
在植物細胞中,葉綠素存在葉綠體的類囊體膜中,是植物進行光合作用的重要物質(zhì),相信大家在生物科學中也都有所認識。高等植物中主要含葉綠素A和葉綠素B,在褐藻、硅藻類中含葉綠素A、C1、C2;紅藻中含葉綠素D等。為了有效區(qū)分出不同植物中的葉綠素含量,大多數(shù)研究人員會直接利用葉綠素檢測儀進行測量,快速準確。
如果還有朋友對葉綠素檢測儀不夠了解的話,我們可以從它的測量原理說起。該儀器是根據(jù)葉綠體色素提取液對可見光譜的吸收,利用分光光度計在某一特定波長測定其吸光度,即可用公式計算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯—比爾定律,某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常數(shù)。當溶液濃度以百分濃度為單位,液層厚度為1cm時,α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長下的吸光系數(shù)可通過測定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì),則此混合液在某一波長下的總吸光度等于各組分在相應波長下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。今欲測定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量,只需測定該提取液在三個特定波長下的吸光度A,并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測定葉綠素a、b時為了排除類胡蘿卜素的干擾,所用單色光的波長選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大吸收峰。
簡單來說,葉綠素檢測儀也就是在葉綠素選擇吸收特定波長光的兩個波長區(qū)域,根據(jù)葉片透射光的量來計算出葉綠素含量的。另外,根據(jù)葉綠素含量,人們可有效判斷出作物對氮素的需求量,就能合理控制氮肥的施用量,減少浪費,這也正是利用儀器測量的意義所在。
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