如何使用蛋白質(zhì)測定儀檢測豆?jié){蛋白質(zhì)?
蛋白質(zhì)與生命的起源、存在和進化都密切相關(guān)。蛋白質(zhì)測定涉及到生產(chǎn)和科研的諸多領(lǐng)域。如今,比較常用的測定方法還屬凱氏定氮法,用到的儀器就是我們今天要講的ZDDN-II蛋白質(zhì)測定儀,該方法是適用范圍最廣測定結(jié)果最準確的方法。
蛋白質(zhì)測定儀能檢測食品、糧食、飲料、飼料中的蛋白質(zhì)含量。以豆?jié){檢測為例,蛋白質(zhì)測定步驟如下:
一、樣品消化
量取豆?jié){約15ml,移入干燥的100mL凱氏燒瓶中,加入0.2g硫酸銅和6g硫酸鉀,稍搖勻后瓶口放一小漏斗,加入20mL濃硫酸,將瓶以450角斜支于有小孔的石棉網(wǎng)上,使用萬用電爐,開始時用低溫加熱,待內(nèi)容物全部炭化,泡沫停止后,再升高溫度保持微沸,消化至液體呈藍綠色澄清透明后,繼續(xù)加熱0.5h,取下放冷,小心加20mL水,放冷后,無損地轉(zhuǎn)移到100mL容量瓶中,加水定容至刻度,混勻備用,即為消化液。
二、蒸餾吸收
蒸餾和吸收是在蛋白質(zhì)測定儀(凱氏定氮儀)內(nèi)進行的。凱氏定氮蒸餾裝置種類甚多,大體上都由蒸氣發(fā)生、氨的蒸餾和氨的吸收三部分組成。
三、滴定
樣品和空白蒸餾完畢后,一起進行滴定。打開接受瓶蓋,用酸式微量滴定管以0.0100mol/L的標準鹽酸溶液進行滴定。待滴至瓶內(nèi)溶液呈暗灰色時,用蒸餾水將錐形瓶內(nèi)壁四周淋洗一次。若振搖后復(fù)現(xiàn)綠色,應(yīng)再小心滴入標準鹽酸溶液半滴,振搖觀察瓶內(nèi)溶液顏色變化,暗灰色在一二分鐘內(nèi)不變,當(dāng)視為到達滴定終點。
若呈粉紅色,表明已超越滴定終點,可在已滴定耗用的標準鹽酸溶液用量中減去0.02mL,每組樣品的定氮終點顏色必須完全一致?瞻讓φ找航邮芷績(nèi)的溶液顏色不變或略有變化尚未出現(xiàn)綠色,可以不滴定。記錄每次滴定耗用標準鹽酸溶液毫升數(shù),供計算用。