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定氮儀蒸餾器測定蛋白質(zhì)含量的蒸餾過程

來源: http://m.pfyin.com/  類別:實用技術(shù)  更新時間:2015-03-13  閱讀
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定氮儀蒸餾器我們一般也簡單的稱為蒸餾器,是一種可以單獨使用對樣品進行蒸餾或者跟消化爐一起使用用來用來測定蛋白質(zhì)的氮含量的設(shè)備。
 
凱式定氮法測定樣品中蛋白質(zhì)含量一般可以分為四個步驟:消化、蒸餾、吸收、滴定。消化樣品需要用到消化爐,蒸餾則是運用定氮儀蒸餾器進行蒸餾。
 
凱式定氮法測定蛋白質(zhì)含量的蒸餾過程如下:
 
1.洗滌蒸餾器:用水洗滌干凈定氮儀蒸餾器,在蒸汽發(fā)生器中加入用幾滴硫酸酸化的蒸餾水和幾滴甲基紅指示劑,用這樣的水蒸氣洗滌凱氏定氮儀。約15分鐘后,在冷凝器下端傾斜放好裝有硼酸-指示劑的錐形瓶,繼續(xù)蒸汽洗滌2分鐘,觀察錐形瓶內(nèi)的溶液是否變色,如不變色則證明蒸餾裝置內(nèi)部已洗滌干凈。移走錐形瓶,停止加熱,打開夾子。
 
2.蒸餾器蒸餾過程:取下棒狀玻塞,用吸管吸取消化液,細心地插到反應(yīng)室小玻璃杯的下方,塞緊棒狀玻塞。將一個含有硼酸和指示劑的錐形瓶放在冷凝器下方,使冷凝器下端浸沒在液體內(nèi)。取30%的氫氧化鈉溶液10ml放入小玻璃杯中,輕提棒狀玻璃塞使之流入反應(yīng)室(為了防止冷凝管倒吸,液體流入反應(yīng)室必須緩慢)。尚未完全流入時,將玻璃塞蓋緊,向玻璃杯中加入蒸餾水約5ml。再輕提玻璃塞,使一半蒸餾水慢慢流入反應(yīng)室,一半留在玻璃杯中作水封。加熱水蒸汽發(fā)生器,沸騰后夾緊夾子,開始蒸餾。氨氣進入錐形瓶,瓶中的酸溶液由紫色變成綠色。變色時起記時,再蒸餾5分鐘。移動錐形瓶,使硼酸液面離開冷凝管約1 厘米,并用少量蒸餾水洗滌冷凝管口外面,繼續(xù)蒸餾1分鐘,移開錐形瓶,用表面皿覆蓋錐形瓶。蒸餾完畢后,須將反應(yīng)室洗滌干凈,再繼續(xù)下一個蒸餾操作。待樣品和對照均蒸餾完畢后,同時進行滴定。
 
蒸餾是滴定的前提,只有將樣品中的含氮物質(zhì)完全蒸餾出來,才能進行滴定,如果定氮儀蒸餾器沒有將含有的化學物質(zhì)完全蒸餾吸收,那么測出的蛋白質(zhì)結(jié)果將有偏差。
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