實(shí)驗(yàn)對油菜籽葉綠素的檢測
油菜籽是草本十字花科作物,是我國主要油料作物和蜜源作物之一,其籽粒是制浸油脂原料主要品種之一。我國是世界油菜生產(chǎn)和消費(fèi)大國,油菜為我國第一大植物油源,我國年均油菜面積和總產(chǎn)居世界首位。
菜籽中的葉綠素含量高低直接影響菜籽油品質(zhì)和加工成本,因此日益受到育種家及油脂加工行業(yè)的重視。日本、加拿大、澳大利亞等國已將油菜籽中葉綠素的含量作為油菜籽分等分級的重要技術(shù)依據(jù)。
菜籽葉綠素含量高,高溫高濕加工時(shí)形成脫鎂葉綠素,一方面會使菜籽油色澤加深,呈墨綠色,影響菜籽油外觀品質(zhì),加工過程中脫色脫嗅工藝越復(fù)雜,加工成本越高;另一方面它是一種光敏劑,能引發(fā)自由基反應(yīng),促進(jìn)油脂氧化反應(yīng),導(dǎo)致油脂酸敗變質(zhì),穩(wěn)定性大為降低,極大縮短了產(chǎn)品貨架期。因此研究建立適合我國國情并與國際接軌的油菜籽葉綠素測定技術(shù)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。
實(shí)驗(yàn)在對油菜籽中葉綠素的提取試劑、提取技術(shù)、檢測儀器(例如葉綠素檢測儀)條件等進(jìn)行了研究,建立了混合溶劑研磨提取,多波長分光光度法檢測油菜籽葉綠素的方法,并利用所建立的方法,對2004-2006年全國油菜品質(zhì)普查樣品以及國外收集樣品進(jìn)行了葉綠素含量的測定,主要研究結(jié)果如下:
1.通過對油菜籽葉綠素提取方式,樣品的研磨細(xì)度、提取試劑、提取方式、提取時(shí)間、提取溫度等提取條件及提取過程中葉綠素穩(wěn)定性的系統(tǒng)研究,建立了溶劑研磨-紫外可見光譜聯(lián)用技術(shù)測定油菜籽中葉綠素含量的檢測技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)方法。即樣品研磨細(xì)度40目后,石油醚+無水乙醇混合溶劑提取葉綠素,專用不銹鋼制提取管加入研磨鋼珠,水平搖床震蕩提取1小時(shí),中速定性濾紙濾,625nm、665nm、705nm分光光度計(jì)多波長測定吸光度值,計(jì)算葉綠素含量。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,葉綠素a的重現(xiàn)性(RSD)分別為1.62%,檢出限(3d)為0.155mg/L,回收率為94.4~98.0%,本方法已經(jīng)作為農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)頒布:NY/T1287-2007《油菜籽中葉綠素含量的測定(光度法)》,為油菜籽中葉綠素含量測定的提供了科學(xué)的依據(jù)。
2.采用所建立的標(biāo)準(zhǔn)方法,對我國油菜主產(chǎn)區(qū)征集的120份油菜籽樣品、加拿大、澳大利亞等油菜主產(chǎn)國征集的26油菜籽進(jìn)行了檢測,分析比較了我國不同種植區(qū)域、不同種皮顏色、國內(nèi)外不同收獲年份的油菜籽樣品葉綠素含量,初步探明了油菜籽葉綠素含量分布與差異,冬油菜葉綠素含量1~10mg/kg,明顯低于春油菜葉綠素含量10~40mg/kg;品種的種皮顏色對葉綠素影響不大;而我國菜籽葉綠素含量明顯低于加拿大、澳大利亞等國。