粗纖維測定方法
粗纖維:是指動物飼料中那些稀酸、稀堿難溶的、家畜(特別是反芻動物)
不容易消化的部分。其中主要成分是纖維素和木質(zhì)素。
膳食纖維:是指人們的消化系統(tǒng)或者消化系統(tǒng)中的酶不能消化、分解、吸收的物質(zhì)。
纖維素是高分子化合物,分子式以(C6H10O5)n表示,不溶于任何有機溶劑,對稀酸或稀堿相當穩(wěn)定,但纖維素與硫酸或鹽酸共熱時完全水解得α-葡萄糖,不完全水解得纖維二糖。
根據(jù)纖維素的性質(zhì),用稀酸或稀堿處理樣品,將雜質(zhì)去除后用重量法測定。如果與濃硫酸共熱可得葡萄糖,用容量法測定。重量法簡便、快速,比較粗糙。
(一)重量法測纖維素
1.原理:在稀硫酸作用下,可使淀粉、糖、果膠質(zhì)、色素和半纖維素水解而除去,再用NaOH溶液皂化脂肪酸,溶解蛋白質(zhì)而除去,最后殘渣減去灰分即得粗纖維素。
2.操作步驟:
稱樣2-5g(鮮樣20-30g)→用乙醚提脂肪后(無脂肪可省略)→轉(zhuǎn)入500ml錐型瓶→加煮沸的200ml→連接回流冷凝后→加熱煮沸→保持30mim→30min后取下→立即用布氏漏斗過濾→用沸水洗至不顯酸性(用甲基紅檢查)。
用煮沸的0.3N NaOH200ml沖洗濾布上的殘物于燒杯中→(連接回流冷凝管)→微沸30分鐘→取出用濾布過濾→沸水洗2-3次→洗到酚酞指示劑不呈堿性反應(yīng)為止→用蒸餾水把濾布上的殘存物洗入100ml燒杯內(nèi)→倒入有石棉的古氏坩堝內(nèi)→抽去水份→用10-20mlC2H5OH洗一次→抽干(或用乙醚洗幾次)→將坩堝與內(nèi)容物→于105℃烘干箱烘2-4h→移入干燥器30min→稱重(恒重)→于700℃灼燒1hr→使殘留物全部灰化→干燥冷卻→稱重(損失重量即為粗纖維的含量)。
3.計算
粗纖維%=(a-b)×100/W
a:在105下經(jīng)干燥后稱得的恒重,g
b:灼燒后稱得的重量,g
w:樣品重量,g
用這種方法測出不完全是粗纖維,還有部分半粗纖維素,戊乳粉及含氮物質(zhì)。
(二)容量法:
1.原理:樣品用2%ml除去可容性糖類、淀粉和半纖維素后,再用80%硫酸使纖維素溶解,纖維素和硫酸在加熱之后,水解為葡萄糖,根據(jù)葡萄糖的含量換稱成纖維素。
根據(jù)反應(yīng)式162.1:180.12=0.9:1;0.9克纖維素水解后得1克葡萄糖
2.方法:
稱樣5g→于250ml磨口三角瓶中→加2%Hcl150ml(用HCl除去可溶性糖類、淀粉和半纖維等)→回流沸騰4h→古氏石棉坩堝抽濾→用熱水洗至無Cl-為止→抽干→再用乙醇和乙醚各洗滌一次→放室溫2h(使乙醚揮發(fā))→將坩堝與沉淀物移入原燒杯→加10倍量的80%硫酸→放3h使纖維素水解→加15倍酸量的水→于70℃水浴加熱5h→水解為葡萄糖→冷卻定容至1000ml→測葡萄糖含量
3.計算
纖維素%=葡萄糖%×0.9