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【本資訊由中國(guó)糧油儀器網(wǎng)提供】蛋白質(zhì)是鑒定飼料質(zhì)量時(shí)必測(cè)的常規(guī)營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)。目前飼料廠普遍采用的標(biāo)準(zhǔn)方法其實(shí)質(zhì)仍是凱氏定氮法，但是由于粗蛋白質(zhì)測(cè)定過(guò)程相對(duì)較復(fù)雜，很多飼料企業(yè)在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中當(dāng)出現(xiàn)結(jié)果異常時(shí)不知道如何去分析;有些操作過(guò)程不嚴(yán)密，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，給生產(chǎn)企業(yè)造成損失。筆者根據(jù)自己的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，總結(jié)了飼料粗蛋白質(zhì)測(cè)定準(zhǔn)確度應(yīng)注意的一些事項(xiàng)。

    凱氏定氮法的基本原理 樣品在催化劑的存在下，用硫酸消煮分解，使蛋白質(zhì)及其他化合物中的氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨，硫酸銨在濃堿的作用下放出氨氣，通過(guò)蒸餾，氨氣隨汽水順著冷凝管流入硼酸溶液，與之結(jié)合成為四硼酸銨，用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，即可測(cè)定放出的氨氮量。根據(jù)氮量，乘以特定系數(shù)，一般為6.25，即可得出樣品中粗蛋白質(zhì)含量。

    操作過(guò)程中應(yīng)注意的事項(xiàng) 消化時(shí)應(yīng)在凱氏瓶中加幾粒玻璃珠，以防消化時(shí)硫酸暴沸液體濺失，并在凱氏瓶口上蓋一小漏斗使蒸汽凝結(jié)回流，這樣會(huì)使消化完全。

    開(kāi)始消化要用小火，待樣品焦化，泡沫消失后，逐步緩慢加強(qiáng)火力，消化過(guò)程中經(jīng)常轉(zhuǎn)動(dòng)凱氏瓶，將濺到瓶壁上的黑渣全部浸入凱氏燒瓶底部的硫酸溶液內(nèi)，以避免消化不完全。消化時(shí)要控制好溫度，380℃較好，過(guò)低消化時(shí)間長(zhǎng)，且不完全;過(guò)高會(huì)引起氮的損失。由于電爐不好控制溫度，最好使用可調(diào)電爐或功率為800w的電爐。

    消化液達(dá)到透明并非表明樣品已經(jīng)消化完全，為防止測(cè)定結(jié)果偏低，需要進(jìn)一步加熱補(bǔ)充消化至少2小時(shí)。

    在樣品停止加熱后，如冷卻時(shí)間過(guò)長(zhǎng)易引起硫酸樣液凝結(jié)不易溶解（尤其冬天季節(jié)），故應(yīng)冷卻至不燙手時(shí)加入少量蒸餾水（約20毫升），搖動(dòng)凱氏瓶，轉(zhuǎn)移到容量瓶中，冷卻、定容。但要注意水與熱硫酸的劇烈反應(yīng)，以免凱氏瓶破裂。

    樣液加入蒸餾裝置后，應(yīng)先用棒狀玻璃塞封口，并加水密封，防止漏氣。然后再加入堿液，這個(gè)順序不能弄錯(cuò)，否則會(huì)造成測(cè)定結(jié)果偏低。同時(shí)要注意堿液要緩慢加入，不可太快。

    滴定用的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液必須準(zhǔn)確，使用前應(yīng)將溶劑瓶上下?lián)u動(dòng)幾次，保證溶液濃度均勻一致。滴定時(shí)注意排空滴定管底部的氣泡，確保滴定結(jié)果準(zhǔn)確。(作者：譚旭信；蘭尊海；李梅蘭)