淀粉氮含量測定詳細流程
淀粉類樣品定氮檢測,最重要的環(huán)節(jié)是淀粉樣品消化過程,消煮過程控制好升溫速率,適量加入雙氧水來加快消煮能更好更快速的完成消煮實驗。試驗證明,采用凱氏定氮儀測定相比傳統(tǒng)的標準方法測定更方便,能加快實驗的效率。接下來就讓我們一起來學習一下淀粉氮含量測定的詳細步驟吧!
一、取樣:
稱取10g淀粉樣品,精確至0.0001g,然后倒入干燥凱氏燒瓶內(nèi),注意不要將樣品沾在瓶頸內(nèi)壁上。對粘狀或糊狀樣品,則可用一個小玻璃盛器或不產(chǎn)生氮的鋁片紙或塑料上稱重,或氮含量已知的盛器,盛品留在瓶內(nèi),如盛器產(chǎn)生氮的話,應做空白測定后折算。
二、消煮
加入催化劑10g,并用量筒加入體積為4倍樣品重量計算的毫升濃硫酸。輕輕擺動燒瓶,混合瓶內(nèi)樣品,直至團塊消失,樣品完全濕透,加入防沸物(如玻璃珠)。燒瓶放到消化架上,裝上排氣裝置,開始加熱裂解。小心加熱液體,使之逐漸沸騰,待液體澄清后繼續(xù)加熱1小時。
三、試樣處理:
①使用滴管稱取約2g左右的淀粉樣品,15ml濃硫酸,2g左右的催化劑(硫酸銅硫酸鉀),靜置半小時。
②放置于消煮爐上,正常升溫至100℃(開始變黑)。
③100℃持續(xù)10分鐘,升至150℃(完全變黑,并開始出現(xiàn)泡沫)。
④升溫至200℃過程中,同時加入10滴30%的過氧化氫溶液。
⑤200℃穩(wěn)定5分鐘,加入10滴30%的過氧化氫溶液。
⑥升至250℃,同時加入10滴30%的過氧化氫溶液。
⑦穩(wěn)定10分鐘,升至300℃,同時加入5滴30%的過氧化氫溶液。
⑧穩(wěn)定10分鐘,升至400℃,同時加入5滴30%的過氧化氫溶液。
⑨間隔10分鐘加入5滴30%的過氧化氫溶液,直至溶液中固體(黑色泡沫)完全溶解。
⑩等待溶液變?yōu)橥该鞯乃{綠色時繼續(xù)加熱1小時。
四、測定:
消解完之后將樣品冷卻至室溫,即可使用凱氏定氮儀測定凱氏氮含量,得到的氮含量乘以相對應的系數(shù)可得到蛋白質的含量。